
动物选择 | 3只 Balb/c 小鼠 |
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佐剂 | 先使用弗氏完全佐剂(completeFreund's adjuvant, CFA) 进行初次免疫,然后使用弗氏不完全佐剂 (incomplete Freund's Adjuvant ,IFA)进行加强免疫。 |
抗原 | 客户提供抗原2-3mg;或者定制抗原。 |
动物免疫时间表 (2个月) | a) 每个药物免疫3只Balb/c小鼠。 b) ELISA检测药物抗体免疫效果。 |
细胞融合及克隆筛选 (1个月) | a) 每个药物进行3次融合;20 x96孔培养板/融合 b) ELISA筛选克隆:通过ELISA检测抗血清,用人IgG为阴性对照(客户提供),药物抗体为阳性对照。选择合适的小鼠进行细胞融合。 |
亚克隆、ELISA筛选和亚型鉴定 (2个月) | a) 对筛选的阳性克隆亚克隆化,并进行亚型鉴定。 b) 每个药物提供给客户10个阳性单克隆。 |
上清生产与鉴定 (1个月) | a) 滚瓶培养1-2L培养基生产抗体。 b) ELISA检测培养上清。 |
抗体纯化与鉴定 (15天) | a) Protein G纯化培养上清中的抗体,获得10-20mg抗体。 b) ELISA鉴定纯化的抗药物抗体。 |
运输和交付 (2-3天) | a) 每个药物抗体提供10-20mg抗药物抗体和阳性杂交瘤株。 b) 抗药物抗体浓度>1mg/mL,溶于pH7.2的PBS。 |
项目时间合计 | 24-28周(不包括抗原制备时间) |
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